ICS65.020 CCSB33DB2110 辽阳市地方标准 DB2110/T0012—2022 芝麻抗黑斑病鉴定技术规范 2022-11-11发布 2022-12-11实施 辽阳市市场监督管理局发布 DB2110/T0012—2022 1前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 本文件由辽阳市农业农村局提出并归口。 本文件起草单位：辽宁省经济作物研究所。 本标准主要起草人：程洪森、孙会杰、那艳斌、安启源、高德学、王超、窦淑华、王正军、吕 仕大、陈雅丽、田静、李传家、孙晓莹、王国权。 本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行 反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。联系方式如下： 辽阳市农业农村局辽阳市文圣区北翰林路38号0419-2122696 辽宁省经济作物研究所辽阳市白塔区胜利路65号0419-3678931 DB2110/T0012—2022 2芝麻抗黑斑病鉴定技术规范 1范围 本文件规定了芝麻抗黑斑病（Alterrariasesami)鉴定技术的术语和定义、病原物接种体制备、田间 抗性鉴定、病情调查、抗病评价和鉴定记载方法。 本文件适用于芝麻品种及种质资源对黑斑病抗性的田间鉴定及评价。 2术语和定义 2.1抗病性 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。 2.2致病性 病原物所具有的破坏寄主和引发病变的能力，是一种病原物固有的特性。 2.3抗性评价 根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。 2.4抗病性鉴定 通过适宜技术方法判别植物对特定侵染性病害反应程度和抵抗水平的描述。 2.5人工接种 在适宜条件下，通过人工操作将病原菌接种体直接或间接接种到植物体适当部位，并使植物发病的 过程。 2.6病情级别 人为定量植物个体或群体发病程度的数量化描述。 2.7病原分离物 采用人工方法从植物发病部位分离获得的在特定环境条件下培养的病原物。 2.8培养基 可以使病原物生长的自然或人工配制的营养基质。 2.9接种体 DB2110/T0012—2022 3用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。 2.10接种悬浮液 用于接种的含有定量接种体的液体。 2.11芝麻黑斑病 由芝麻链格孢菌(Alternariasesami(Kawamura)Mohanty&Behera)侵染为害芝麻叶片、茎秆的病害。 主要危害芝麻叶片，发病初期叶片上形成褐色或深褐色的圆形、椭圆形病斑；病情严重时病斑扩展至整 个植株，出现叶片褶皱、边缘卷曲、脱落、枯死等症状，严重影响芝麻产量和品质。 3病原物接种体制备 3.1病原物分离 常规组织分离法从发病植株叶片的典型病斑分离芝麻黑斑病病原物。取芝麻黑斑病典型症状的病 叶，取病叶病健交界组织，切成1～2cm的小块，2%次氯酸钠（NaOCl）表面消毒2分钟，后用无菌 水漂洗3次，置于水琼脂培养基（WA）上，28°C培养，待病原菌产生分生孢子后，在高倍体视镜下从 WA培养基上用接种针挑取单孢，获得纯化菌株，-40℃低温长期保存、备用。 3.2接种物繁殖与保存 于接种前，将纯化的芝麻链格孢菌接种到PDA平板上，以菌体在培养基表面多点分布为宜，28℃ 培养5～7天，待菌落产生大量分生孢子后，将病菌分生孢子用无菌水洗下，2层纱布过滤，加入0.3% 吐温20，配制成孢子悬浮液（浓度1.0×105个孢子/mL），供接种用。如孢子悬浮液不能立即接种用，可 置4℃冰箱保存，以不超过3天为宜。 4田间抗性鉴定 4.1抗性鉴定圃设置 鉴定圃设置应具备良好的自然发病环境条件和灌溉条件，且地势平坦、地力均匀的地块。 4.2鉴定设计 鉴定材料按品种生育期早晚分组，同组材料按顺序排列，行长5m，2行区，行距0.55m，小区保 苗80株左右，3次重复。每50份鉴定材料各设1组抗、感病对照，抗病对照品种为辽芝9号，感病对 照品种为大志白芝麻。 DB2110/T0012—2022 44.3种植要求 鉴定材料播种时间、栽培管理与大田栽培相同。 4.4接种 4.4.1接种时期 芝麻植株盛花期，即50%植株开花6～7朵时进行接种，一般在7月22～29日（辽阳），早熟品 种适当提早接种。 4.4.2接种方法 喷雾法接种。采用高压喷雾器将孢子悬浮液均匀喷在植株中上部，喷液量以叶片和蒴果上孢子悬浮 液不流淌为宜。选择傍晚或阴天进行接种，小雨天接种最佳。 4.5接种后管理 在接种后若无有效降雨，应在接种后24小时内进行田间人工清水辅助叶面喷雾、保湿，从早晨7 时开始每间隔2小时喷雾一次，到晚上6时止。 5病情调查 5.1调查时间 接种后30天左右，进行发病情况调查。 5.2调查方法 每小区随机选取10株，目测调查植株总体发病程度，逐份材料调查病株中部（植株1/2处）以上 10片叶片，记载叶片病斑面积所占叶片总面积的百分比。 5.3病情分级 田间抗性评价标准分为9级，病情分级及其对应的症状描述见表1和图1。 表1芝麻抗黑斑病鉴定病情级别划分标准 病情级别 症状描述 1 整株叶片无病症或叶片上有少量病斑，病斑面积≤5%，叶片平整、无异常； 3 叶片上有较多斑点，5%＜病斑面积≤15%，叶片正常，偶见轻微褶皱； 5 叶片上有相连病斑，15%＜病斑面积≤25%，叶片局部有褶皱，边缘略弯曲； 7 叶片上有大量病斑相连，有较大斑块，25%＜病斑面积≤50%，叶片凸凹不平，边缘明 DB2110/T0012—2022 5显卷曲； 9 叶片几乎被病斑覆盖，病斑连片，病斑面积＞50%，叶片卷曲、脱落或枯死。 6抗性评价 6.1鉴定有效性判别 当感病对照材料达到其相应感病程度，该批次材料抗黑斑病鉴定视为有效。 6.2抗性评价标准 根据鉴定材料的群体发病程度（病情级别）确定其对黑斑病的抗性水平。按50%以上的发病个体 （叶片）的病情级别作为鉴定材料的群体病情级别值，确定鉴定材料的抗性水平，划分标准见表2。 表2芝麻黑斑病抗性评价标准 病情级别 抗性评价 1 高抗Highlyresistant（HR） 3 抗Resistant（R） 5 中抗Moderatelyresistant（MR） 7 感Susceptible（S） 9 高感Highlysusceptible(HS） 7鉴定记载表格 芝麻抗黑斑病鉴定结果记载表格见表3。 表3 年芝麻抗黑斑病鉴定结果记载表 编号品种 名称来源调查 总数病情级别 抗性 评价 0 1 3 5 7 9 注1:鉴定地点 注2:接种病原菌分离物编号 注3:接种日期 调查日期 DB2110/T0012—2022 6鉴定技术负责人（签字）： DB2110/T0012—2022 7AA 附录A (规范性附录) 芝麻黑斑病症状 A病名和症状描述 A.1病名 芝麻黑斑病 A.2症状描述 芝麻黑斑病是芝麻生产上重要的叶部病害，盛花期最易感病，北方一般在7月下旬～8月中旬开始 发病，感病叶片初期产生黑色斑点，随后上产生圆形、椭圆形或不规则病斑，有轮纹，病斑呈暗褐色或 黑褐色，病斑上产生黑色霉状物，是病菌的分生孢子梗、分生孢子；随着病情发展，病斑颜色变深，病 斑相连形成大的枯斑，叶片出现边缘卷曲，叶片易脱落，严重的可致整株枯死（图1）。 图1芝麻黑斑病不同抗感级别的症状描述 a：病情指数1级；b：病情指数3级；c：病情指数5级；d：病情指数7级；e：病情指数9级；