ICS65.020 CCSB33DB2110 辽阳市地方标准 DB2110/T0013—2022 芝麻抗蒴腐病鉴定技术规范 2022-11-11发布 2022-12-11实施 辽阳市市场监督管理局发布 DB2110/T0013—2022 1前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 本文件由辽阳市农业农村局提出并归口。 本文件起草单位：辽宁省经济作物研究所。 本文件主要起草人：程洪森、那艳斌、徐婧、孙会杰、安启源、高德学、赵丹、王正军、窦淑 华、荣久艳、陈雅丽、王国权、田静、孙晓莹。 本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行 反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。联系方式如下： 辽阳市农业农村局辽阳市文圣区北翰林路38号0419-2122696 辽宁省经济作物研究所辽阳市白塔区胜利路65号0419-3678931 DB2110/T0013—2022 2芝麻抗蒴腐病鉴定技术规范 1范围 本文件规定了芝麻抗蒴腐病鉴定技术的术语和定义、病原接种物制备、田间抗性鉴定、病情调查、 抗性评价和鉴定记载方法。 本文件适用于芝麻品种、杂交种及种质资源对蒴腐病抗性的田间鉴定及评价。 2术语和定义 2.1抗病性 植物体与病原物在长期进化和相互作用的复杂过程中，逐渐形成和表现出抵御有害病原物的特征和 能力。 2.2致病性 病原物所具有的破坏寄主并诱发病害的特性，是一种病原物固有的特性。 2.3抗性评价 根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。 2.4抗病性鉴定 通过适宜技术方法鉴别植物对其特定侵染性病害的抵抗水平。 2.5人工接种 在适宜条件下，通过人工操作将病原菌接种体直接或间接接种到植物体适当部位，并使植物发病的 过程。 2.6病情级别 植物个体或群体发病程度的量化描述。 2.7病原分离物 采用人工方法从植物发病部位分离获得的病原体的纯培养物。 2.8培养基 可以使病原物生长的自然或人工配制的营养基质。 DB2110/T0013—2022 32.9接种体 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。 2.10接种悬浮液 用于接种的含有定量接种体的液体。 2.11芝麻蒴腐病 由链格孢菌（Alternariaalternata）侵染引发芝麻蒴果腐烂的病害，主要危害芝麻蒴果，发病初期蒴 果表面出现褐色或深褐色斑点，随着病情的发展，斑点渐变成不规则病斑，呈黑色或深褐色，后期病斑 包裹整个蒴果，蒴果表皮变硬，并伴随果实开裂，蒴果不实或籽粒瘪小，产量损失严重。 3病原接种体制备 3.1病菌分离 采用常规组织分离法从感病蒴果的典型病斑上分离病原物。取芝麻蒴腐病典型症状的病果，切成 1～2cm的小块，于2%次氯酸钠（NaOCl）表面消毒2分钟，再用无菌水漂洗3次，置于水琼脂培养 基（WA）上，25°C培养，待病原菌产生分生孢子后，用接种针挑取分生孢子于WA培养基上划线稀 释，在高倍体视镜挑取单孢，接种到PDA培养基上培养，获得纯化菌株，-40℃低温长期保存、备用。 3.2接种体繁殖与保存 用PDA培养基进行病原菌繁殖。病原菌转接到PDA平板上，25℃培养5～7天，待菌落上产生大 量分生孢子后，将病原菌分生孢子用无菌水洗下，2层纱布过滤，加入0.3%吐温20，制成孢子悬浮液 （浓度1.0×106个孢子/mL），供接种用。如孢子悬浮液不能立即接种，可置4℃冰箱保存，以不超过3 天为宜。 4田间抗性鉴定 4.1抗性鉴定圃选择 抗病鉴定圃设置在具备良好的自然发病环境条件和灌溉条件，地势平坦、地力均匀的地块。 4.2鉴定设计 鉴定材料按品种生育期早晚分组，同组材料按顺序排列，行长5m，2行区，行距0.55m，小区保苗 80株左右。每50份鉴定材料各设1组抗、感病对照，抗病对照品种辽芝9号，感病对照品种辽芝8号。 DB2110/T0013—2022 44.3种植要求 鉴定材料播种时间与大田生产芝麻播种时间相同，或根据气候条件适当调整。土壤肥力水平和栽培 管理与大田生产相同。 4.4接种 4.4.1接种期 接种期为植株盛花期，即50%植株开花6～7朵时开始接种，时间在7月下旬，早熟品种适当提早接 种。 4.4.2接种方法 喷雾法接种。采用高压喷雾器将孢子悬浮液均匀喷布在植株中上部叶片和蒴果上，喷液量以不流淌 为宜。选择傍晚或阴天进行接种，小雨天接种更佳。 4.5接种后管理 在接种后48小时内进行人工辅助保湿处理，晴天白天每隔2小时，阴天间隔3～4小时，用喷雾器 在接种部位喷清水1次，以增加湿度，确保病害发生。 5病情调查 5.1调查时间 在成熟期进行病害调查。 5.2调查方法 每小区随机选取10株，目测每份鉴定材料总体发病状况，逐份材料调查病株中部（植株1/2处） 以上蒴果，记载蒴果病斑面积所占蒴果总面积的百分比。 5.3病情级别 病情分级及其对应的症状描述见表1。 表1芝麻蒴腐病鉴定病情级别划分标准 病情级别病害症状描述 1 蒴果无病症或病果上零星有黑色小病点，病斑面积≤5%；蒴果几乎无开裂。 3 病果上有少量黑色或褐色病斑，5%＜病斑面积≤20%；蒴果偶见轻微开裂. 5 病果上有较大黑色或褐色斑块，20%＜病斑面积≤40%；部分蒴果部分明显开裂。 DB2110/T0013—2022 57 病果上有较大黑色或褐色斑块，40%＜病斑面积≤60%，大部分蒴果中度开裂； 9病果上有大量黑色或褐色斑块，病斑面积＞60%，大量蒴果开裂. 6抗性评价 6.1鉴定有效性判别 当感病对照材料达到其相应感病程度，该批次材料抗蒴腐病鉴定视为有效。 6.2抗性评价标准 依据鉴定材料的群体发病程度（病情级别），确定其对芝麻蒴腐病的抗性水平。以50%以上发病个 体（蒴果）的病情级别作为鉴定材料群体的病情级别值，确定鉴定材料的抗性，划分标准见表2。 表2芝麻蒴腐病抗性评价标准 病情级别 抗性 1 高抗Highlyresistant（HR） 3 抗 Resistant（R） 5 中抗Moderatelyresistant（MR） 7 感Susceptible（S） 9 高感Highlysusceptible（HS） 7鉴定记载表格 芝麻蒴腐病鉴定结果记载见表3。 表3 年芝麻抗蒴腐病鉴定结果记载表 编号品种 名称来源调查 总数病情级别 抗性 评价 0 1 3 5 7 9 注1:鉴定地点 注2:接种病原菌分离物编号 注3:接种日期 调查日期 鉴定技术负责人（签字）： DB2110/T0013—2022 6AA 附录A 芝麻蒴腐病症状 A病名和症状描述 A.1病害名称 芝麻蒴腐病 A.2症状描述 芝麻蒴腐病是近年我国芝麻生产区突发流行的一种新病害，主要危害芝麻蒴果。发病初期蒴果表面 出现褐色或深褐色斑点，随着病情的发展，斑点渐变成不规则病斑，呈黑色或深褐色，后期病斑覆盖整 个蒴果，使蒴果变小、表皮变硬、绒毛消失，并伴随果实开裂，或呈现黑褐色坏死，导致芝麻蒴果不实 或干枯，产量损失严重。 图1芝麻蒴腐病不同感抗级别的症状描述 a：病情1级；b：病情3级；c：病情5级；d：病情7级；e：病情9级；