ICS 71.100.70 Y 42 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2292—2015 化妆品中斑蝥素的测定 气相色谱-质谱法 Determination of cantharidin in cosmetics by GC-MS method 2015 - 04 - 07 发布 吉林省质量技术监督局 2015 - 05 - 01 实施 发 布 DB22/T 2292—2015 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 和GB/T 20001.4—2001给出的规则起草。 本标准由吉林省食品药品监督管理局提出并归口 。 本标准起草单位：吉林省食品药品检验所。 本标准主要起草人：逄焕欢、赵雪梅、韩晶、方玉林、崔磊。 I DB22/T 2292—2015 化妆品中斑蝥素的测定 气相色谱-质谱法 1 范围 本标准规定了化妆品中斑蝥素测定的原理、试剂和材料、仪器设备、分析步骤、结果计算、精密度。 本标准适用于气相色谱-质谱法测定化妆品中斑蝥素。 本标准对于斑蝥素的检出限为0.06 μg/g，定量限为0.2 μg/g。 2 原理 试样经三氯甲烷提取后，用气相色谱-质谱仪测定，经保留时间和与标准质谱库（NIST）对比定性； 采用外标法进行定量。 3 试剂和材料 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 4 重蒸水。 无水硫酸钠：优级纯。 三氯甲烷（CHCl3）：分析纯。 斑蝥素标准物质：分子式 C10H12O4，CAS 号 56-25-7，纯度≥99.0 %。 斑蝥素标准溶液： a) 标准储备液：准确称取斑蝥素标准品 0.1 g 于 100 mL 容量瓶中，用三氯甲烷溶解并稀释至刻 度，配成浓度约 1 g/L 的标准储备液。标准储备液贮存在 4 ℃冰箱中，可使用 2 个月。 b) 标准工作液：准确吸取标准储备液（3.5.1）1 mL 于 100 mL 容量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻 度， 摇匀，即为 10 mg/L 的标准中间液。分别精密吸取上述标准中间液 0.1 mL、0.5 mL、0.8 mL、 1.0 mL、5.0 mL、8.0 mL、10.0 mL 于 100 mL 容量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，配制成浓 度为 10 μg/L、50 μg/L、80 μg/L、100 μg/L、500 μg/L、800 μg/L、1000 μg/L 的斑蝥素标 准工作液。 仪器设备 4.1 4.2 4.3 5 气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击（EI）源。 天平：感量 0.1 mg 和 1 mg。 离心机：转速≥5000 rpm。 分析步骤 5.1 试样制备 1 DB22/T 2292—2015 称取样品1 g（精确至0.01g）置于50 mL离心管中，加入水(3.1)10 mL，混匀。加三氯甲烷(3.2)10 mL 振摇30 s后静置分层（必要时离心），将有机相放入刻度试管中，补加三氯甲烷至10 mL，加入适量无 水硫酸钠(3.3)干燥，取上清液作为待测液。 5.2 测定条件 气相色谱-质谱条件如下： a) 色谱柱：DB-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm)石英毛细管柱或相当者； b) 载气：氦气，纯度≥99.9 %； c) 流速：1.00 mL/min； d) 进样口温度：250 ℃； e) 进样量：1 μL； f) 进样方式：不分流进样； g) 色谱柱温度：60 ℃保持 1 min，以 6 ℃/min 至 220 ℃，保持 1 min，再以 20 ℃/min 至 280 ℃， 保持 3 min； h) 电离方式：电子轰击电离（EI）； i) 电离能量：70 eV j) 离子源温度： 250 ℃； k) 接口温度：250 ℃； l) 溶剂延迟：3 min； m) 监测方式：选择离子检测，选择检测离子（m/z）：96、128、70、109 5.3 测定 5.3.1 定性分析 进行样品测定时，样品溶液中待测组分和标准品的特征离子色谱图在相同保留时间处出现，并且在 扣除背景后的样品谱图中，各特征离子满足：相对丰度高于10%的，离子丰度比变化范围小于±15%，相 对丰度低于10%时，离子丰度比变化范围小于±50%的条件时，可定性确证目标分析物。标准样品总离子 流参见附录A图A.1，标准样品质谱图参见附录A图A.2，标准样品选择离子图参见附录A图A.3。 5.3.2 定量分析 吸取标准工作液（3.5.2）1 μL注入气相色谱-质谱联用仪中，质量色谱法选择离子 m/z 128 定量， 以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。 另取待测液（5.1）1 μL进样，测得峰面积，根据标准曲线的线性方程计算。 6 结果计算 结果按式(1)计算： X = c × V × 1000 .................................... (1) m × 1000 式中： X ——样品中斑蝥素的含量，单位为微克每千克（μg /kg）； c ——测定液中斑蝥素的浓度，单位为微克每升（μg /L）； 2 DB22/T 2292—2015 V ——测定液体积，单位为毫升（mL）； m ——样品称取量，单位为克（g）； 平行测定结果用算术平均值表示，结果保留3位有效数字。 7 7.1 7.2 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 8 %。 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10 %。 3 DB22/T 2292—2015 A A 附 录 A （资料性附录） 斑蝥素的离子图和质谱图 斑蝥素总离子流图见图A.1。 图A.1 斑蝥素总离子流图 斑蝥素质谱图见图A.2。 图A.2 斑蝥素质谱图 斑蝥素选择离子图见图A.3。 图A.3 斑蝥素选择离子图 _________________________________ 4