ICS 65.020.20 CCS B 05 DB2301 黑 龙 江 省 哈 尔 滨 市 地 方 标 准 DB 2301/T 95—2021 玉米田短体属线虫动态监测技术规程 2021 - 11 - 19 发布 2021 - 12 - 19 实施 哈尔滨市市场监督管理局 发 布 DB2301/T 95—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中国科学院东北地理与农业生态研究所农业技术中心提出。 本文件由哈尔滨市农业农村局归口。 本文件起草单位：中国科学院东北地理与农业生态研究所农业技术中心、哈尔滨市农业技术推广总 站、先正达（中国）投资有限公司。 本文件主要起草人：潘凤娟、王崇生、李峰、刘聃、许艳丽、胡岩峰、陆欣春、严君、居瀚寻。 I DB2301/T 95—2021 玉米田短体属线虫动态监测技术规程 1 范围 本文件规定了玉米田短体属线虫动态监测技术规程的术语和定义、，包括取样时间和方法、线虫分 离、线虫形态学鉴定、检测结果和档案管理。 本文件适用于哈尔滨市玉米种植区短体属线虫鉴定和普查。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 SN/T 1141 鳞球茎茎线虫检疫鉴定方法 SN/T 2507 咖啡短体线虫检疫鉴定方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 短体属线虫 短体属线虫（Pratylenchus） ，属于线虫门（Nemata）、侧尾腺纲（Secernentea） 、垫刃目（Tylenchida）、 短体科（Pratylenchidae） 、短体亚科（Pratylenchinae） ，具有广泛的寄主范围和地理分布。 3.2 动态监测 在玉米不同生长时期采集根围土样，分析短体属线虫的密度变化。 4 取样时间和方法 4.1 取样时间 在玉米生长期的6月、7月、8月和9月中旬取样。 4.2 取样地块 2 每个玉米地块面积不小于1hm 。 1 DB2301/T 95—2021 4.3 取样方法 采用对角线五点取样法，每个样点由8株玉米根围土样混合而成，约500 g，每株玉米用土壤取样器 采集玉米根围1cm~15cm的土壤。将样品装入取样袋中，保存在4℃~8℃条件，最长14d。应避免在土壤 过干或过湿时取样，取样时将取样点基本情况记入附录A.1。 5 线虫分离 采用改良贝曼浅盘方法分离土壤线虫，在带有内筐的沥水篮底部和周围敷上一层面巾纸，将200g 土样平放在面巾纸上，在沥水篮中加入自来水并没过土样，其间需要补水，48h后用500目筛子收集水中 的线虫于小烧杯中，50℃~60℃水浴杀死线虫，将线虫保存在4%福尔马林固定液中。线虫的分离应按照 SN/T 1141中的规定执行。 6 线虫形态学鉴定 6.1 临时标本制作 用胶头滴管吸一滴保存在固定液中的线虫放在载玻片上，加上盖玻片，注意防止气泡产生。临时玻 片的制作应严格按照SN/T 1141的规定执行。 6.2 线虫形态观察 在显微镜下，对线虫进行形态观察。短体属线虫呈现直或从阴门后略向腹部弯曲；雌虫虫体纤细， 体环明显；侧线通常４条到6条，头部连续到略缢缩，头架骨化强，唇区低平，口针粗壮，口针基部球 发达；背食道腺开口于口针基部球后；中食道球发达，椭圆形，中食道球瓣骨化强，明显；食道腺从虫 体腹面覆盖肠；单生殖腺、前伸，有后阴子宫囊；尾是肛门体宽的2倍到3倍，尾近圆锥形或圆柱形。雄 虫虫体前部形态与雌虫相似，单精巢前伸，精子卵圆形。尾部呈圆锥形，向尾端渐细，末端较钝，交合 伞延伸至尾端。对线虫标本的形态观察，参见SN/T 2507。 7 检测结果 符合 6.2 特征的线虫判定为短体属线虫，将结果记入附录A.2，综合分析该地区短体属线虫的分布 和动态。 8 档案管理 内容包括取样时间和方法、线虫分离、短体属线虫形态学鉴定。档案保存3年以上。 2 DB2301/T 95—2021 AA 附 录 A （资料性附录） 附录 A 基本情况及监测结果调查表 A.1 短体属线虫田间取样调查表参见表A.1。 表A.1 短体属线虫田间取样调查表 样品标号 取样地点 取样时间 2 调查面积（m ） 玉米连作年限 A.2 短体属线虫田间监测结果调查表参见表A.2。 表A.2 短体属线虫田间调查表 样品编号 取样时间 取样地点 短体属线虫(条/200g 鲜土) 备注 3