ICS 11.220 CCS B 41 34 安徽省地方标准 DB34/T 4488 —2023 主要动物疫病定点监测技术规范 Technical regulation for fixed-point m onitoring of major animal diseases 2023 - 07 - 31 发布 2023 - 08 - 31 实施 安徽省市场监督管理局 发布 DB34/T 4488 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由安徽省动物疫病预防与控制中心提出。 本文件由安徽省农业农村厅归口。 本文件起草单位：安徽省动物疫病预防与控制中心、望江县畜牧兽医技术推广中心、滁州市动物疫 病预防与控制中心。 本文件主要起草人：王倩、周迎春、李少炎、许青华、王维、王军、沈艳、刘华、段倩倩、苗文萍、 陈曦、郑举、王立、陈静、金晓宇、杨庆琳、伍唯、何长生、朱良强。 DB34/T 4488 —2023 1 主要动物疫病定点监测技术规范 1 范围 本文件规定了主要动物疫病定点监测点选择、样品的采集、监测项目和方法、档案管理。 本文件适用于主要动物疫病定点监测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 16550 新城疫诊断技术 GB/T 16551 猪瘟诊断技术 GB/T 18090 猪繁殖与呼吸综合征诊断方法 GB/T 18641 伪狂犬病诊断方法 GB/T 18646 动物布鲁氏菌病诊断技术 GB/T 18648 非洲猪瘟诊断技术 GB/T 18935 口蹄疫诊断技术 GB/T 18936 高致病性禽流感诊断技术 GB/T 26436 禽白血病诊断技术 GB/T 27982 小反刍兽疫诊断技术 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 NY/T 680 禽白血病病毒P27抗原酶联免疫吸附试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 定点监测点选择 基本原则 定点监测点应符合当地动物养殖情况、 流通模式、 动物疫病流行特点， 具有代表性。 按照养殖环节、 交易环节、屠宰环节和野禽栖息地，设置生猪、家禽、反刍动物疫病定点监测场点。 定点监测点一经确定，不得随意更改，因特殊原因确需调整的，需选择其他符合条件的场点作为替 换。 养殖环节监测点选择 参照附录A 中表A.1 确定养殖场的大、中、小规模，参照附录A 中表A.2 确定定点监测点数量，按 照当地大、中、小规模场数量占比确定定点监测点大、中、小规模场数量。 DB34/T 4488 —2023 2 其他环节监测点选择 根据当地情况，相应环节个选择 1～2 个定点监测点。 监测群体选择 每个定点监测场点在选择监测群体时，要兼顾畜禽的不同类型、代次、品种，并覆盖不同养殖阶段 的动物群体，并按照存栏比例分配监测群体数量。 监测频率 每年 2 次，5～6月和 11～12月各 1 次。也可根据不同疫病的流行特点、发生情况确定。 5 样品的采集 采样数量 参照附录B 确定每个监测点采样数量，不同群体的采集数量按存栏比例分配后随机采样。 采样方法 按照 NY/T 541 的规定执行，规范填写采样信息表（见附录C 中表C.1～表C.15）。 样品编号 5.3.1 生猪样品编号 血清样品以“AX1～AXn”模式编写， 猪扁桃体以“AB1～ABn”模式编写， 猪鼻/咽拭子以“AS1～ASn” 模式编写。 5.3.2 家禽样品编号 鸡、鸭、鹅分别用 D、E、F 表示，血清样品用 X、蛋清样品用 D、拭子样品用 S、环境样品用 H、 野禽粪便用 G 表示，如鸡血清样品为 DX1～DXn，鸭拭子样品为 ES1～ESn，环境样品为 H1～Hn，野禽粪便样品为 G1～Gn 其他同理。 5.3.3 反刍动物样品编号 牛、羊分别用 B、C 表示，血清样品用 X、脾脏样品用 P、淋巴结样品用 L，食道-咽部分泌物（O- P 液）用 Y 表示，如牛血清为 BX1～BXn，羊食道- 咽部分泌物（O-P 液）为 CY1～CYn，其他同理。 样品的保存和运送 按照 NY/T 541 的规定执行。 6 监测项目和方法 非洲猪瘟 6.1.1 检测项目 6.1.1.1 病原学检测 DB34/T 4488 —2023 3 猪活体采集扁桃体样品、口鼻拭子和全血样品，死亡猪只可采集脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏、骨 髓等组织样品，进行非洲猪瘟病毒核酸检测。 6.1.1.2 血清学检测 要与病原学样品相对应，猪活体采集全血分离出血清样品，进行非洲猪瘟病毒抗体检测。 6.1.2 检测方法 按照 GB/T 18648 的规定执行，采用荧光 PCR方法检测非洲猪瘟病毒核酸，采用酶联免疫吸附实 验方法（ELISA）检测非洲猪瘟病毒抗体。 6.1.3 检测结果统计 填写实验室检测结果统计表（见附录C 中表C.3 和表C.15）。 禽流感 6.2.1 检测项目 6.2.1.1 病原学检测 活禽采集咽喉和泄殖腔双拭子，野禽可采集新鲜粪便，死亡禽可采集气管、肺脏、脑、肠（包括内 容物）、肝脏、脾脏、肾脏、心脏等组织样品，进行禽流感病毒核酸检测。 6.2.1.2 血清学检测 要与病原学样品相对应，活禽采集全血分离出血清样品，进行禽流感病毒抗体检测。 6.2.2 检测方法 按照 GB/T 18936 的规定执行，采用荧光 RT -PCR方法检测 H5、H7 和 H9 亚型禽流感病毒核酸， 采用血凝抑制实验方法（HI）检测 H5、H7 和 H9 亚型禽流感病毒抗体。 6.2.3 检测结果统计 填写实验室检测结果统计表（见附录C 中表C.6 和表C.15） 口蹄疫 6.3.1 检测项目 6.3.1.1 病原学检测 猪活体采集扁桃体、水泡液、水泡皮样品，牛羊活体采集食道-咽部分泌物（ O-P液）、水泡液、水 泡皮样品，屠宰场或死亡动物可采集淋巴结、脊髓、心脏肌肉等组织样品，进行口蹄疫病毒核酸检测。 6.3.1.2 血清学检测 要与病原学样品相对应，猪、牛、羊活体采集全血分离出血清样品，进行口蹄疫病毒抗体检测。 6.3.2 检测方法 按照 GB/T 18935 的规定执行，采用荧光 RT-PCR方法检测口蹄疫病毒核酸，采用液相或固相阻断 酶联免疫吸附试验方法检测 O型和 A型口蹄疫病毒抗体。 DB34/T 4488 —2023 4 6.3.3 检测结果统计 填写实验室检测结果统计表（见附录C 中表C.3、表C.9、表C.12 和表C.15）。 小反刍兽疫 6.4.1 检测项目 6.4.1.1 病原学检测 羊活体采集眼鼻拭子，屠宰场或死亡动物采集淋巴结、脾脏、胸腺、肠粘膜、肺脏等组织样品，进 行小反刍兽疫病毒核酸检测。 6.4.1.2 血清学检测 要与病原学样品相对应，羊活体采集全血分离出血清样品，进行小反刍兽疫病毒抗体检测。 6.4.2 检测方法 按照 GB/T 27982 的规定执行，采用荧光 RT-PCR方法检测小反刍兽疫病毒核酸，采用酶联免疫吸 附实验方法（ELISA）检测小反刍兽疫病毒抗体。 6.4.3 检测结果统计 填写实验室检测结果统计表（见附录C 中表C.12 和表C.15）。 布鲁氏菌病 6.5.1 检测项目 牛羊活体采集全血分离出血清样品，进行布鲁氏菌抗体检测。 6.5.2 检测方法 按照 GB/T 18646 的规定执行， 采用凝集类实验 （RBT、SAT和MRT） 或酶联免疫吸附实验方法 （ELISA） 检测布鲁氏菌抗体。 6.5.3 检测结果统计 填写实验室检测结果统计表（见附录C 中表C.9 和表C.12）。 猪瘟 6.6.1 检测项目 6.6.1.1 病原学检测 猪活体采集扁桃体样品，死亡猪只可采集扁桃体、淋巴结、胰脏、脾脏、回肠、肝脏和肾脏等组织 样品，进行猪瘟病毒核酸检测。 6.6.1.2 血清学检测 要与病原学样品相对应，猪活体采集全血分离出血清样品，进行猪瘟病毒抗体检测。 6.6.2 检测方法