ICS 65.150 B 52 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 1103—2008 松浦鲤 Songpu carp 行业标准信息服务平台 2008-07-14 发布 2008-08-10实施 中华人民共和国农业部 发布 SC/T 1103—2008 言 前 本标准的附录 A 为规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所。 本标准主要起草人：关海红、石连玉、李池陶、刘明华。 行业标准信息服务平 SC/T 1103—2008 松浦鲤 1范围 长与繁殖、遗传学特性以及检测方法。 本标准适用于松浦鲤的种质检测与鉴定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法 GB/T18654.3养殖鱼类种质检验第3部分：性状测定 GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析 GB/T17716—1999青鱼 3名称与分类 3.1学名 松浦鲤(Cyprinus carpio var.Songpu) 3.2分类位置 鲤形目（Cypriniformes）、鲤科（Cyprinidac）、鲤亚科（Cyprininae）、鲤属（Cyprinus）、鲤亚属（Cypri- nus)、鲤种(Cyprinus carpio)。 4主要生物学性状 4.1外部形态特征 4.1.1外形 体形较粗壮，体侧扁而高，体宽而厚，头较小，头后背部隆起。口亚下位，呈马蹄形，上颌包着下颌， 吻圆钝能伸缩。须2对。眼较大，位于头侧上方。背鳍具有硬刺，前缘平直，后缘锯齿较粗，排列稀。胸 鳍末端不达腹鳍。尾鳍分叉较浅，上下叶末端尖。体被有较大鳞片，鳞片为圆鳞，边缘颜色稍深，体色随 栖息水域环境不同而有所变化，通常鱼体背部为青灰色，体侧金黄色，腹部白色，尾鳍下叶橙红色。松浦 鲤的外部形态见图1。 4.1.2可数性状 4.1.2.1 背鳍鳍式:D.ii～iv-16～19。 4.1.2.2臀鳍鳍式：A.ii-5。 4.1.2.3左侧第一鳃弓外侧鳃粑数：21～24。 台 4.1.2.5 5须2对，吻须长为颌须长的1/2左右。 1 SC/T 1103—2008 图1松浦鲤外部形态 4.1.3可量性状 不同体长组个体，可量性状变动值见表1。 表1不同体长组松浦鲤的可量比例性状(土S.D.) 2 3 组 别 1 33.4~40.8 47.6~54.0 全长，cm 17.42~24.58 体长，cm 27.1~34.7 39.2~52. 5 13.52~20.05 2.55±0.22 2.55±0.10 体长/体高 2.30±0.12 4.60±0.34 5.5±0.69 5.95±0.45 体长/体厚 3.93±0.37 4.23±0.18 3.43±0.19 体长/头长 3.25±0.22 3.49±0.16 头长/吻长 3.09±0.21 5.49±0.31 5.93±0.22 头长/眼径 5.03±0.39 头长/眼间距 2.34±0.21 2.39±0.53 2.54±0.18 6.20±0.59 体长/尾柄长 5.85±0.44 6.14±0.68 体长/尾柄高 7.3±0.76 7.83±0.28 6.75±0.39 注：每组测量样品数为60尾。 4.2内部构造特征 4.2.1 分两室，前室较后室大，后室末端稍尖，呈锥状。 4.2.2下咽齿 下咽齿3行，齿式为1·1·3/3·1·1。 4.2.3脊椎骨 行业标准信息服务平 脊椎骨总数35～39。 4.2.4腹膜 腹膜为银白色。 5生态特征 5.1食性 以底栖生物为主的杂食性营养类型，养殖条件下也可摄食人工饲料。 5.2适宜水温 摄食水温10℃～28℃，最适生长水温18℃～25℃，能安全过冰封期。 2 SC/T 1103—2008 6 生长与繁殖 6.1生长 不同年龄组鱼的实测体长和体重见表2。 表2各年龄组鱼的实测体长和实测体重 年龄,龄 1 2 3 体长,cm 13.52~20.05 27.1~34.7 39.2~52.5 体重,g 119~304 722~1164 1275~2060 6.2繁殖 6.2.1性成熟年龄 长江流域性成熟年龄雌鱼2龄～3龄，雄鱼2龄；黑龙江流域雌鱼3龄～4龄，雄鱼2龄～3龄。 6.2.2产卵类型 卵黏性，性腺一年成熟一次,春季产卵，分批产卵。 6.2.3繁殖水温 适宜水温16℃～25℃，最适水温20℃～22℃。 6.2. 4 怀卵量 怀卵量随着年龄和体重增长而增加,不同年龄组个体怀卵量见表3。 表 3不同年龄组个体的怀卵量 年龄,龄 3 4 5 体长，cm 35.0~40.0 41.0~45.0 46.0~51.0 绝对怀卵量",粒 167 000~227000 186 000~452 560 450500~526200 相对怀卵量b,粒/ g 93~124 105~147 140~156 绝对怀卵量：卵巢中达到IV时相卵母细胞的数量; b 相对怀卵量：单位体重(g)所占有卵粒数。 7 遗传学特性 7. 1细胞遗传学特性 7.1.1体细胞染色体数：2n=100。 7.1.2染色体臂数：NF=164。见图2。 7.2生化遗传特性 松浦鲤肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳酶谱见图 3,表现为10条带,酶带的相对活性强度 见表4。 表4 松浦鲤肝组织LDH同工酶酶带相对活性强度 LDHi 酶带 LDH2 LDH; LDH. LDH, LDH LDH LDH. LDH, LDHio 相对活性,% 8. 987 14.982 7.816 6. 567 12.082 2. 695 9. 194 4.419 3. 546 1.711 7.3分子遗传学特性 根据GeneBank中的藻酸盐诱导鲤鱼48h胚胎cDNAC88410序列设计引物，采用PCR技术,对松 浦鲤鳍组织进行PCR扩增和序列测定，获得了长度为760bp片段，图谱见图4。 8检测方法 8.1抽样 3 SC/T 1103—2008 xx Xr nn rr xx X ~n 10 μm 2松浦鲤染色体组型图 图 2 LDH, LDH2 LDH LDH4 LDHs LDH. LDH, LDH: LDH, LDHio 松浦鲤肝LDH同工酶电泳酶谱 图3 760bp SL 一分子量标准 M 图4引物C88410扩增松浦鲤鳍组织 DNA的PCR图谱 按GB/T18654.2的规定执行。 8.2主要形态构造特征 按GB/T18654.3的规定执行。 8.3年龄鉴定 4 SC/T 1103—2008 年龄鉴定主要依据鳞片上的年轮数，方法按GB/T17716一1999的规定执行。 8.4繁殖性能的测定 按GB/T17716—1999的规定执行。 8.5染色体组型分析 按GB/T18654.12规定执行。 8.6同工酶电泳分析 8.6.1样品的采集与制备 取健康松浦鲤的肝组织1g,加3mL磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH=7.1)(配置方法见附录表A.1)， 用匀浆器匀浆，将匀浆液于4℃、12000r/min离心30min，取上清液，重复以上离心过程2次，至上清液 澄清。 8.6.2电泳条件及染色方法 8.6.2.1制胶 将混匀的7.5%胶液（凝胶液配方见附录表A.2)倒入LKB制胶专用模板，插好梳子，36℃条件下， 放置40min，待凝胶聚合后，于冰箱中备用。 8.6.2.2点样 吸取10μL样与2μL～3μL溴酚蓝混匀，一起加到样孔中。 8.6.2.3电泳分离 采用聚丙烯酰胺凝胶平板连续电泳（LKB电泳仪）。胶浓度为7.5%，电极缓冲液为pH8.3的 Tris-甘氨酸（见附录表A.3）。前电泳：稳流50mA，电泳30min；预电泳：稳流30mA，电泳30min；电 泳：稳流20mA（起始电压400V)电泳4h～5h，待溴酚蓝跑出胶约1h后电泳结束，放人预先配好并在 37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。染色液配方见附录表A.4。 8.6.3结果判定 根据电泳染色后凝胶上的谱带数目及相对活性强度等加以判定。 本标准由凝胶分析软件Genetools根据酶谱带染色强度不同自动识别,不排除采用具有同等功效 的其他凝胶分析系统观察。 8.7分子遗传学特征的测定 8.7.1基因组DNA的提取 取鳍组织，尽量剪碎，用DNA提取试剂盒或常规酚方法提取基因组DNA，TE溶解后一20℃保存 备用，TE溶液的配置见附录A.5。 8.7.2PCR扩增 8.7.2.1引物 引物C88410序列为:Right:gcagccaacatgggagttat Left: tccccactaactttgatgcc 8.7.2.2PCR反应体系 为25μL体积,其中含有：50mmol/L氯化钾（KCl),10mmol/L三羟甲基氨基甲烷一盐酸缓冲液 (Tris-HCl)（室温下pH=8.4)，1.5mmol/L氯化镁MgCl2,100μg/mL明胶或牛血清白蛋白（BSA）,2 个引物(Right和Left)各0.25μmol/L，4种底物(dATP+dCTP+dGTP+dTTP)各200μmol/L，模板 DNA 0. 5 μg