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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111154617.5 (22)申请日 2021.09.2 9 (66)本国优先权数据 202011208703.5 2020.1 1.03 CN (71)申请人 广州辑因医疗科技有限公司 地址 510000 广东省广州市南沙区珠 江街 南江二路6号10 栋 (72)发明人 方日国 马奎莹 李超 袁鹏飞 (74)专利代理 机构 北京彩和律师事务所 1 1688 专利代理师 闫桑田 刘磊 (51)Int.Cl. G01N 33/68(2006.01) G01N 33/543(2006.01) A61K 35/28(2015.01) A61P 7/00(2006.01)A61P 7/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61P 19/02(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 25/00(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 37/04(2006.01) (54)发明名称 细胞制剂、 蛋白在表征造血干细胞中的用途 及判定造血干细胞的方法 (57)摘要 本发明公开了一种细胞制剂、 蛋白在表征造 血干细胞中的用途及判定造血干细胞的方法, 所 述细胞制剂是待分选的细胞中分选得到的CD34 +、 CD90+、 CD45RA ‑以及下述蛋白为阳性的造血干 细胞, 所述蛋白选自CD48、 CD66a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD200中的一种或两种以上。 通过使用本 发明所述的蛋白对造血干细胞进行表征, 不仅在 体外能更准确的标定和评价目的细胞, 还能提高 患者在接受造血干细胞移植后, 能维持长效重建 造血系统的能力, 达 到更好的治 疗效果。 权利要求书2页 说明书15页 附图13页 CN 114460304 A 2022.05.10 CN 114460304 A 1.蛋白在表征造血干细胞中的用途, 其中, 所述蛋白包括 (1)CD34、 CD90和CD45RA; 和 (2)选自CD48、 CD6 6a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD20 0中的一种或两种以上。 2.根据权利要求1所述的用途, 其中, 所述蛋白包括 (1)CD34、 CD90和CD45RA; 和 (2)CD66a、 CD66e和/或CD20 0, 优选为CD6 6e。 3.一种用于判定 造血干细胞的方法, 其包括: 检测待测细胞 是否为CD34阳性; 检测待测细胞 是否为CD90阳性; 检测待测细胞 是否为CD45RA阴性; 和 检测待测细胞 是否为下述蛋白阳性, 其中, 所述蛋白选自CD48、 CD6 6a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD20 0中的一种或两种以上, 当待测细胞为CD34阳性、 CD90阳性、 CD45RA阴性和选自CD48、 CD66a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD20 0中一种或两种以上的蛋白阳性时, 判定其 为造血干细胞。 4.根据权利要求3所述的方法, 其中, 所述待测细胞来源于脐血、 募集外周血或骨髓。 5.根据权利要求3或4所述的方法, 其中, 所述蛋白为CD66a、 CD66e和/或CD200, 优选为 CD66e。 6.一种筛 选造血干细胞的方法, 其包括: 从待分离细胞中筛 选出CD34+、 CD90+、 CD45RA ‑以及下述蛋白为阳性的造血干细胞; 其中, 所述蛋白选自CD48、 CD6 6a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD20 0中的一种或两种以上。 7.根据权利要求6所述的方法, 其中, 所述待分离细胞来源于脐血、 募集外周血或骨髓。 8.根据权利要求6或7所述的方法, 其中, 所述蛋白为CD66a、 CD66e和/或CD200, 优选为 CD66e。 9.一种细胞制剂, 其包括从待分选的细胞中分选得到的CD34+、 CD90+、 CD45RA ‑以及下 述蛋白为阳性的造血干细胞, 所述蛋白选自CD48、 CD66 a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD200 中的 一种或两种以上。 10.根据权利要求9所述的细胞制 剂, 其中, 所述待分选的细胞来源于脐血、 募集外周血 或骨髓。 11.根据权利要求9或10所述 的细胞制剂, 其中, 所述蛋白为CD66a、 CD66e和/或CD200, 优选为CD6 6e。 12.一种制备细胞制剂的方法, 其包括: 从待分选细胞中筛 选出CD34+、 CD90+、 CD45RA ‑以及下述蛋白为阳性的造血干细胞; 其中, 所述蛋白选自CD48、 CD6 6a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD20 0中的一种或两种以上。 13.根据权利要求12所述的方法, 其中, 所述待分选细胞来源于脐血、 募集外周血或骨 髓。 14.根据权利要求12或13所述的方法, 其中, 所述蛋白为CD66a、 CD66e和/或CD200, 优选 为CD66e。 15.一种用于提高造血系统的重建能力的药物, 其包括权利要求9 ‑11中任一项所述的 细胞制剂或者权利要求12 ‑14中任一项所述的方法制备 得到的细胞制剂。权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 114460304 A 216.一种重建受试者造血系统方法, 包括给予受试者权利要求9 ‑11中任一项所述的细 胞制剂或者权利要求12 ‑14中任一项所述的方法制备 得到的细胞制剂。 17.一种检测造血干细胞的试剂盒 或产品, 包括用于检测如下 各项的化 合物: 检测待测细胞 是否为CD34阳性; 检测待测细胞 是否为CD90阳性; 检测待测细胞 是否为CD45RA阴性; 和 检测待测细胞 是否为下述蛋白阳性, 其中, 所述蛋白选自CD48、 CD66a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD200中的一种、 两种、 三种、 四 种或四种以上。 18.权利要求17的试剂盒或产品, 其 中所述蛋白为CD66a、 CD66e和CD200中的一种、 二种 或三种, 优选为CD6 6e。 19.权利要求17或18的试剂盒或产品, 其中, 所述待分离细胞来源于脐血、 募集外周血 或骨髓。 20.权利要求17 ‑19任一项的试剂盒 或产品, 其中所述 化合物为抗体。 21.权利要求20的试剂 盒或产品, 其中所述抗体为化学标记的抗体, 例如发光化合物标 记的抗体, 例如荧 光标记的抗体。 22.权利要求20的试剂盒 或产品, 其中所述 抗体为附着于磁珠的抗体。 23.一种分选或富集造血干细胞的试剂盒或产品, 包括用于从待分选或富集的细胞中 分选CD34+、 CD90+、 CD45RA ‑以及下述蛋白为阳性的造血干细胞的化合物, 所述蛋白选自 CD48、 CD6 6a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD20 0中的一种 、 两种、 三种、 四种或四种以上。 24.权利要求23的试剂盒或产品, 其 中所述蛋白为CD66a、 CD66e和CD200中的一种、 二种 或三种, 优选为CD6 6e。 25.权利要求23或24的试剂盒或产品, 其中, 所述待分离细胞来源于脐血、 募集外周血 或骨髓。 26.权利要求23 ‑25任一项的试剂盒 或产品, 其中所述 化合物为抗体。 27.权利要求26的试剂 盒或产品, 其中所述抗体为化学标记的抗体, 例如发光化合物标 记的抗体, 例如荧 光标记的抗体。 28.权利要求26的试剂盒 或产品, 其中所述 抗体为附着于磁珠的抗体。 29.一种筛选造血干细胞培养基的方法, 包括使用待筛选培养基培养造血干细胞后检 测如下表征的造血干细胞的比例的维持或升降, 所述造血干细胞CD34+、 CD90+、 CD45RA ‑以 及下述蛋白为阳性, 所述蛋白选自CD48、 CD66a、 CD66c、 CD66d、 CD66e和CD200中的一种、 两 种、 三种、 四种或四种以上, 其中上述表征的造血干细胞经过培养后的比例得以维持或上升 表示待筛 选培养基为适宜的造血干细胞培 养基。 30.经过权利要求2 9的方法筛 选的造血干细胞培 养基。 31.一种治疗受试者疾病的方法, 包括给予受试者有效量的权利要求9 ‑11中任一项所 述的细胞制剂或者权利要求12 ‑14中任一项所述的方法制备 得到的细胞制剂。权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 114460304 A 3
专利 细胞制剂、蛋白在表征造血干细胞中的用途及判定造血干细胞的方法
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